數字PCR儀實現了定量及稀有等位基因的檢測

　　數字PCR儀是一種核酸檢測和定量分析的新方法││☁▩，可以作為傳統實時定量PCR的替代方法││☁▩，以實現一致定量及稀有等位基因的檢測│▩。數字PCR的工作原理在於將DNA或cDNA樣品分割為許多單獨◕·、平行的PCR反應││☁▩，部分這些反應包含了靶標分子（陽性）││☁▩，而其他不包含（陰性）│▩。單個分子可以被擴增一百萬倍或更多│▩。在擴增期間││☁▩，TaqMan化學試劑及染料標記探針可用於檢測特定序列的靶標│▩。當不存在任何靶標序列時││☁▩，沒有訊號累積│▩。PCR分析後││☁▩，陰性反應片段用於生成樣品中靶標分子的一致計數││☁▩，而無需標準品或內標│▩。

　　納流晶片的使用提供了便捷和直觀的機制來同時平行執行上千個PCR反應│▩。每個孔都加入了樣品◕·、擴增混合物和TaqMan測定試劑的混合物││☁▩，然後進行單獨分析以檢測存在（陽性）或不存在（陰性）終點訊號│▩。考慮到孔可能接收到多個靶標序列分子││☁▩，使用泊松模型應用了一個校正因子│▩。

　　數字PCR儀和試劑能夠提高現有TaqMan測定的效能││☁▩，從而實現更高的靈敏度◕·、精度和一致定量││☁▩，使應用從中獲益│▩。

　　PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成││☁▩，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖複製│▩。在使用PCR儀的過程中需要注意以下事項☁╃：

　　1）環境要恆定││☁▩，運作環境的溫度不能過高或過低││☁▩，在用空調的房間使用││☁▩，有些PCR儀有溫度保護程式││☁▩，在過低的溫度下機器不能啟動│▩。

　　2）電源要穩定││☁▩，工作的電壓不能波動過大││☁▩，波動過大會造成電子器件損壞││☁▩，一般建議將PCR儀電源接於穩壓電源上│▩。

　　3）儘量不要儲存過夜││☁▩，能經常使用就不容易壞│▩。

　　4）數字PCR儀在使用前要詳細閱讀使用說明書││☁▩，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸儀表││☁▩，打電話諮詢廠家或技術支援部門││☁▩，透過指導進行維修│▩。