梯度PCR儀跑膠有問題怎麼辦✘✘•◕☁？

　　梯度PCR儀與普通PCR儀的區別在於溫度的控制上面││☁▩，普通PCR的孔所有溫度是一樣的││☁▩，而梯度PCR儀卻能夠讓不同的孔有不同溫度││☁▩，比如橫向有12個孔││☁▩，退火溫度可以從低到高₪▩·。

 

　　梯度PCR儀與普通PCR儀的區別主要是在功能上││☁▩，而功能的體現主要是在溫度上││☁▩，而在效能上的體現確實大大不同的₪▩·。由於傳統的普通PCR儀一次只能執行一個特定的退火溫度││☁▩，因此如果要設定不同的退火溫度││☁▩，那麼就需要多次執行才能夠實現││☁▩，這一過程需要花費大量的時間

 

　　PCR儀實際就是一個溫控裝置││☁▩，能在95℃││☁▩，55℃││☁▩，72℃之間很好地進行溫度控制││☁▩，而梯度PCR儀的梯度也要做一下介紹││☁▩，梯度實際上是指PCR時退火溫度條件可以設定一系列不同的溫度梯度││☁▩，因此人們把這樣的PCR儀稱之為是梯度PCR儀₪▩·。廣泛應用於科研☁✘、教學☁✘、臨床醫學☁✘、檢驗☁✘、檢疫等領域的一款儀器裝置││☁▩，在實驗室中的應用頻率很高││☁▩，

 

　　PCR跑膠││☁▩，目的條帶很亮││☁▩，但是邊沿不清楚││☁▩，前後有拖尾現象₪▩·。出現這樣的問題││☁▩，則需要進行細緻的分析││☁▩，因為引起該問題的可能很多₪▩·。可先檢查是否模板質量問題││☁▩，如有降解等││☁▩，模板應避免反覆凍融₪▩·。

 

　　也有可能是抽提RNA時有汙染││☁▩，則需要重新抽提RNA₪▩·。此外││☁▩，也可能是非特異性擴增引發該問題││☁▩，可提高退火溫度││☁▩，少迴圈次數₪▩·。電泳緩衝液時間太長││☁▩，ph值和鹽離子濃度明顯改變☁✘、電泳時電壓太高☁✘、電泳液過久沒換││☁▩，電泳膠髒了等都可能引發該問題₪▩·。

 

　　如果不是由上述原因引起││☁▩，則進一步檢查加樣量是否過大││☁▩，制膠過程中膠孔是否制好││☁▩，EB是否沖洗乾淨☁✘、模板中是否混有基因組DNA或蛋白等₪▩·。也需考慮是否擴增的條件不合適₪▩·。針對具體原因再採取相應的措施₪▩·。